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        第三方评测: 新冠病毒检测,Takara qPCR试剂表现出色

         
        bioRxiv is receiving many new papers on coronavirus SARS-CoV-2.   A reminder: these are preliminary reports that have not been peer-reviewed. They should not be regarded as conclusive, guide clinical practice/health-related behavior, or be reported in news media as established information.
         
        新冠肺炎疫情在全球快速蔓延,准确地对新冠病毒进行检出至关重要。尽管抗体检测可以快速、简便地得到结果,但通过qPCR方法进行核酸检测,仍然是判断疑似病例或患者是否携带病毒、是否具有传染性的“金标准”。纵观全球众多qPCR试剂供应商,Takara产品多年来一直以高质量、高稳定性著称,在疫情下的紧急时刻,英国科学家以第三方的角度,对多个行业内知名品牌的qPCR产品进行了测评。
         
        2020年4月17日,英国科学家在bioRxiv预印本平台发表文献——Comparison of SARS-CoV2 N gene real-time RT-PCR targets and commercially available mastermixes。作者比较了四种主流的RT-qPCR试剂,使用新冠病毒N基因RNA转录本作为模板测定各试剂的灵敏度,并通过74个鼻咽拭子样本进行验证。
         
        结果显示:N2基因显示了最佳的敏感度;四种一步法RT-qPCR试剂中的三种表现良好;在最低检出界限方面,Takara One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(Code No. RR600)表现最为出色。
         
        ■ 实验方法
        作者构建了新冠病毒N基因的RNA转录本,吸光度测定后10倍稀释至1– 100,000 copies/μl。提取了74个疑似感染者的鼻/咽拭子样本的总RNA,并在提取过程中加入了犬瘟病毒(PDV)细胞培养物作为阳性内参照。根据各产品说明书配置了25 μl反应体系,加入7.5 μl RNA模板,设置阳性和阴性对照,按照快速反应程序设置仪器反应条件。
         
        ■ 实验结果
        1. N基因转录本作为模板,检测三对引物、探针的灵敏度
        使用文献上和CDC 2020公布的三对不同N基因引物、探针进行检测。其中CDC 2020的N2位点引物/探针,在模板只有1 copy/μl的情况下,四种试剂中三种均可以检出。
        2. N基因转录本作为模板,检测四种试剂的灵敏度
        四种测评试剂中,Takara在三组检测结果中,灵敏度均可以达到1 copy/μl。而其他知名品牌的产品灵敏度在1-100 copies/μl之间。
        3. 74个鼻/咽拭子提取核酸作为模板,Takara vs Q公司试剂
        74个疑似感染者的样本,使用两种试剂进行检测后,67个样本的结论是一致的,包括29个阳性和38个阴性。另外7个样本,Takara试剂实验判定为阳性,但Q公司试剂实验判定为阴性。
        另外,Takara试剂的扩增曲线荧光信号背景值远低于Q公司产品。
         
        ■ 文章结论
        在新冠病毒检测方面,无论是构建的病毒模板,还是实际患者样本作为模板, Takara公司One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(Code No. RR600)与同样世界知名的试剂供应商产品相比,都表现出了更好的灵敏度、更低的荧光信号背景。
        文献中产品RR600 One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix,2019年上市,是Takara先进的研发技术的展示,是完全预混型的探针法One Step RT-qPCR试剂,操作简单,并具有卓越的抗反应阻碍物能力,我们还可以提供带有UNG版本的产品RR601,防止假阳性产生。
        Takara探针法One Step RT-qPCR家族,以不同特长满足客户的不同需求。
        Takara也可以根据客户的习惯提供更灵活的散装试剂,以现有的产品目录为基础,修改配方、包装量、包装规格或提供大体积的散装试剂,当然,也可以提供形成文件的质量保证书等材料。
        Takara致力于为全球科学家提供高质量、高稳定性的产品,在对抗新冠病毒的战斗中,我们做了充分的准备:货源充足,保证货期,保持稳定价格。