无标题文档
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■ 制品内容 (50 次量) |
| PrimeScript II RTase (200 U/μl) |
50 μl |
| 5×PrimeScript II Buffer |
200 μl |
| RNase Inhibitor (40 U/μl) |
25 μl |
| dNTP Mixture (10 mM each) |
50 μl |
| Oligo dT Primer (50 μM) |
50 μl |
| Random 6 mers (50 μM) |
100 μl |
| RNase Free H2O |
1 ml |
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| ■ 制品说明 |
本制品是使用PrimeScript II RTase从Total RNA或Poly (A)+ RNA合成1st Strand cDNA的试剂盒。含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂。
以结构复杂的RNA或长链RNA为模板进行cDNA合成时，cDNA合成受到抑制的主要原因是RNA高级结构与反转录酶的非特异性结合。并且，由于反转录酶的错配引起的非特异性延伸，对RT-PCR或全长cDNA的合成非常不利。PrimeScript II RTase是对PrimeScript RTase进行进一步改良的反转录酶，本反转录酶可以很好地抑制RNA高级结构与反转录酶的非特异性结合。
本制品使用了PrimeScript II RTase，利用Oligo dT从PolyA开始进行延伸反应，使用标准反转录温度42℃，不仅能维持PrimeScript RTase原有的卓越的cDNA合成效率和cDNA合成速度，同时可以合成本底低、纯度高、完整性好的cDNA。另外，反转录反应液配制时所产生的非特异性延伸是抑制cDNA合成的主要原因，本制品能有效控制这一现象。反应液配制后，冰上放置直至反转录反应开始，不会发生抑制cDNA合成的现象。
合成的1st Strand cDNA可广泛应用于2nd Strand cDNA合成、杂交、PCR法扩增等。特别适用于全长cDNA文库制作、高纯度全长cDNA合成等。
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| ■ 保存 |
| -20℃。 |
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